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技術(shù)文章

細(xì)胞培養(yǎng)簡介

點擊次數(shù):14383   發(fā)布時間:2021/9/27 10:36:46

什么是細(xì)胞培養(yǎng)?
細(xì)胞培養(yǎng)是指從動物或植物中取出細(xì)胞,然后使其在合適的人工環(huán)境中生長。這些細(xì)胞可于培養(yǎng)直接從組織中取出并采用酶或機械方法進行解離,或者也可來自已經(jīng)建立的細(xì)胞系或細(xì)胞株。

原代培養(yǎng)
原代培養(yǎng)是指將細(xì)胞從組織中分離后,使其在合適的條件下增殖直到占據(jù)所有可用基質(zhì)(即:達到匯合狀態(tài)) 的培養(yǎng)階段。在此階段,必須將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到新的容器中并更換新鮮培養(yǎng)基,從而對細(xì)胞進行傳代培養(yǎng),為其提供更多繼續(xù)生長的空間。

細(xì)胞系
次傳代培養(yǎng)后,原代培養(yǎng)物即被稱為細(xì)胞系或者亞克隆。來自于原代培養(yǎng)的細(xì)胞系壽命有限 (即:有限細(xì)胞系,見下文),隨著細(xì)胞的傳代,生長能力強的細(xì)胞會占據(jù)優(yōu)勢,終導(dǎo)致細(xì)胞群體在基因型和表型上達到一定程度的均一性。

細(xì)胞株
如果將細(xì)胞系的一個亞群通過克隆或者其他方法從培養(yǎng)物中明確地選擇出來,則此細(xì)胞系就成為一個細(xì)胞株。與親代細(xì)胞系起始時相比,細(xì)胞株往往會獲得其他一些遺傳學(xué)改變。

有限細(xì)胞系
與連續(xù)細(xì)胞系正常細(xì)胞通常只能分裂有限的次數(shù),隨后就會喪失增殖的能力,這是一個由遺傳決定的事件,被稱為衰老;這種細(xì)胞系被稱為有限細(xì)胞系。但是,一些細(xì)胞系會通過被稱為轉(zhuǎn)化的過程變?yōu)橛郎约?xì)胞系,這一過程可自然發(fā)生,也可經(jīng)化學(xué)或病毒誘導(dǎo)發(fā)生。有限細(xì)胞系發(fā)生轉(zhuǎn)化獲得無限分裂能力后,就成為連續(xù)細(xì)胞系。

培養(yǎng)條件
各種細(xì)胞的培養(yǎng)條件相差很大,但是細(xì)胞培養(yǎng)的人工環(huán)境必須包括合適的容器,容器中含有一定的基質(zhì)或介質(zhì),為細(xì)胞提供必需的營養(yǎng)素 (氨基酸、碳水化合物、維生素、礦物質(zhì))、生長因子、激素和氣體 (O2、CO2),并可調(diào)節(jié)其物理化學(xué)環(huán)境 (pH、滲透壓、溫度)。

大多數(shù)細(xì)胞均具有貼壁依賴性,必須貼附在固體或半固體基質(zhì)上培養(yǎng) (貼壁或者單層培養(yǎng)),而另一些細(xì)胞則可在培養(yǎng)基中漂浮生長 (懸浮培養(yǎng))。凍存如果傳代時有多余的細(xì)胞,可通過適當(dāng)?shù)谋Wo劑 (例如:DMSO 或甘油) 處理細(xì)胞,儲存在 –130°C 以下的溫度下 (凍存),直到需要使用之時。

培養(yǎng)細(xì)胞的形態(tài)

根據(jù)形狀和外觀 (即:形態(tài)) 可將培養(yǎng)的細(xì)胞分為三大類。
• 成纖維細(xì)胞 (或者成纖維細(xì)胞樣細(xì)胞) 為雙或多細(xì)胞,呈細(xì)長形,貼附在基質(zhì)上生長。


• 上皮樣細(xì)胞呈多角形,尺寸更為規(guī)則,貼附在基質(zhì)上呈散在斑片狀生長。


• 淋巴母細(xì)胞樣細(xì)胞呈球形,通常懸浮生長,不貼附在基質(zhì)表面。



細(xì)胞培養(yǎng)的應(yīng)用

細(xì)胞培養(yǎng)是細(xì)胞和分子生物學(xué)中重要的一項技術(shù),可為細(xì)胞正常生理和生化 (例如:代謝研究、衰老研究)、藥物和毒性化合物對細(xì)胞的作用以及致突變和致癌研究提供上佳的模型系統(tǒng)。細(xì)胞培養(yǎng)還可用于藥物篩選和開發(fā)以及生物化合物 (例如:疫苗、治療性蛋白) 的大規(guī)模生產(chǎn)。細(xì)胞培養(yǎng)在上述域應(yīng)用的主要優(yōu)勢在于,可以使用一批同源細(xì)胞獲得穩(wěn)定、可重復(fù)的結(jié)果。

原創(chuàng)作者:上海恒遠(yuǎn)生物技術(shù)發(fā)展有限公司

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